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圖片來源于“攝圖網”

本期內容將為大家詳細拆解動物實驗從設計到執(zhí)行的關鍵步驟與常見誤區(qū)，幫助實驗室新手少走彎路。

一、為什么做動物實驗前一定要申報倫理？
無論你是做藥物評估、腫瘤建模，還是進行干預實驗，都必須經過動物倫理審查。動物實驗不是“買了老鼠就能上手”的項目，倫理是合法與否的分水嶺。

倫理審查的必要性：

符合《實驗動物管理條例》等法規(guī)；
是發(fā)表SCI等高水平論文的前提；
避免造成不必要的動物痛苦。

審批材料通常包括：

實驗目的與意義
動物種屬、數量、來源
麻醉與安樂死方法
研究風險及人道終點
實驗步驟圖或流程表

建議至少提前1個月準備倫理申報材料，避免項目延期。

二、動物實驗前的準備工作有哪些？
動物實驗“看似簡單，實則復雜”，前期準備決定了實驗是否順利開展。

1. 動物選擇與購入

常見模型動物：小鼠（BALB/c、C57BL/6、裸鼠）、大鼠、豚鼠、兔；
選型要基于實驗目的，如免疫功能、腫瘤生長、代謝研究等；
動物需來自正規(guī)供應商（如 SPF 級實驗動物中心）。

2. 實驗分組與樣本量估算

盡量使用隨機分組（Randomization）；
使用樣本量計算工具（如G*Power）預估所需動物數量；
結合3R原則（替代、減少、優(yōu)化）優(yōu)化設計。

3. 實驗器材與藥品準備

麻醉藥（戊巴比妥鈉、異氟烷）；
注射器、灌胃針、動物磅秤；
建模用藥、干預藥物或細胞懸液。

三、不同類型的建模與干預方式簡介
1. 疾病模型建立

疾病類型	常見建模方式
腫瘤模型	接種腫瘤細胞（皮下、腹腔、尾靜脈）
糖尿病模型	STZ誘導、HFD+STZ組合
炎癥模型	LPS注射、DSS造模
神經系統(tǒng)模型	MCAO腦缺血模型、阿爾茲海默誘導劑

2. 藥物干預方式

灌胃 gavage：常用于模擬臨床口服；
腹腔注射 IP：起效快，適用于短效藥物；
靜脈注射 IV：技術要求高，多用于抗腫瘤藥；
局部敷貼/皮下注射：適用于局部作用或緩釋制劑。

四、動物實驗中的關鍵操作注意事項
1 動物麻醉與鎮(zhèn)痛

麻醉劑應按體重換算劑量，避免過量；
使用異氟烷時注意通風與操作安全；
對于術后操作，可選用布比卡因等鎮(zhèn)痛藥，提升動物福利。

2 給藥/取樣過程中的技巧

灌胃：體位固定，喉頭對準，避免誤吸；
注射：注意角度和深度，避免刺穿內臟或血管；
采血：可用尾靜脈、眼眶、心臟采血（僅限終點）；
解剖取材：需在安樂死后進行，避免痛苦。

五、動物實驗結束后別忘了這些環(huán)節(jié)
1 數據記錄與樣本保存

每只動物的數據（體重、癥狀、存活等）應獨立記錄；
所得組織標本需統(tǒng)一編號、冷凍/固定保存；
建議建立Excel數據庫，方便統(tǒng)計分析。

2 組織處理與病理分析

常用器官：肝、腎、脾、肺、腦、腫瘤組織；
石蠟包埋、HE染色、免疫組化等是后續(xù)分析重點；
如有需要，可做流式細胞術、WB、PCR等分子層級分析。

3 動物安樂死處理

合理方法包括：超量麻醉、CO?吸入；
應遵循倫理申報內容，避免隨意處理；
安樂死前記錄終點指標，保障實驗數據完整。

六、常見新手誤區(qū)及解決建議

問題	可能原因	建議解決方案
模型構建失敗	接種細胞濃度不準、操作感染	嚴格操作無菌流程，提前預實驗
給藥劑量不準	未精確計算體重換算	每次稱量動物體重并按mg/kg核算
灌胃時動物死亡	手法不熟練、誤入氣管	先用色素水訓練手感，熟練再上正式組
安樂死方式不合規(guī)	使用不被認可的方法	遵循倫理批準的標準方案